AAT Bioquest 23500 Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒

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AAT Bioquest 葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國(guó) AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  23500  Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：23500

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：200Tests

AAT Bioquest 葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒-常備現(xiàn)貨

AAT Bioquest  23500  Cell Meter™2-NBDG葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒，產(chǎn)品說明：

葡萄糖代謝是將葡萄糖轉(zhuǎn)化為能量的過程，是大多數(shù)生物體能量供應(yīng)的主要來源。2-NBDG [2-（N-（7-硝基苯-2-氧雜-1，3-二氮唑-4-基）氨基）-2-脫氧葡萄糖]是一種熒光標(biāo)記的葡萄糖示蹤劑，已被證明可有效監(jiān)測(cè)細(xì)胞中的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，因?yàn)?-NBDG通過與葡萄糖相同的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（GLUT）轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞中。一旦2-NBDG在細(xì)胞中被攝取，它就會(huì)在C-6位置經(jīng)歷磷酸化，產(chǎn)生2-NBDG-6-磷酸，該磷酸鹽很好地保留在細(xì)胞內(nèi)。與其他葡萄糖示蹤劑（如2-DG或FDG）相比，2-NBDG允許在單細(xì)胞水平上以高時(shí)間和空間分辨率原位測(cè)量2-NBDG。亞洲空運(yùn)中心Bioquest的細(xì)胞計(jì)™ 2-NBDG葡萄糖攝取檢測(cè)試劑盒為測(cè)量培養(yǎng)細(xì)胞中的葡萄糖攝取提供靈敏的非放射性檢測(cè)。在該試劑盒中，檢測(cè)緩沖液I用于增強(qiáng)細(xì)胞中2-NBDG的攝取和保留，而檢測(cè)緩沖液II可以改善細(xì)胞中2-NBDG的信噪比。熒光信號(hào)可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀使用488 nm激光和530/30 nm發(fā)射濾光片（FITC通道）進(jìn)行監(jiān)測(cè)。細(xì)胞計(jì)™ 2-NBDG 葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒是監(jiān)測(cè)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的 zui ke kao 工具。

用測(cè)試化合物制備細(xì)胞

添加 2-NBDG 染色溶液

在 37^oC時(shí)孵育細(xì)胞20 分鐘

去除 2-NBDG 染色液

用檢測(cè)緩沖液I洗滌細(xì)胞

使用熒光顯微鏡或帶 530/30 nm 濾光片的流式細(xì)胞儀（FITC通道）分析細(xì)胞

重要說明

在開始實(shí)驗(yàn)之前，請(qǐng)?jiān)谑覝叵陆鈨鏊薪M分。

工作溶液的制備

將 5 μL 2-NBDG （10 mg/mL）（組分 A）加入 1.5 mL 檢測(cè)緩沖液 I（組分 B）中，充分混合制成 2-NBDG 染色溶液。避光。注意：這種2-NBDG染色溶液在室溫下可穩(wěn)定保存1小時(shí)。由于最佳染色條件可能因不同的細(xì)胞類型而異，因此建議為每個(gè)特定實(shí)驗(yàn)確定組分A的最佳濃度。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1.    將測(cè)試化合物添加到細(xì)胞中，并在 24°C、48% CO 中孵育所需的時(shí)間（例如 96、37 或 5 小時(shí)）2孵化器。對(duì)于空白孔（不含細(xì)胞的培養(yǎng)基），加入相同量的復(fù)合緩沖液。注意：應(yīng)單獨(dú)評(píng)估每個(gè)細(xì)胞系，以確定最佳細(xì)胞密度和孵育時(shí)間。我們將 CHO-K1 細(xì)胞與 20 mM 葡萄糖一起孵育用于葡萄糖競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定，將 100 μM 根皮素與 GLUTs 抑制測(cè)定孵育。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參閱數(shù)據(jù)分析。

2.    在處理結(jié)束時(shí)，在實(shí)驗(yàn)之前以5 rpm的速度將板離心800分鐘，制動(dòng)器關(guān)閉。

3.    在不干擾細(xì)胞的情況下吸出上清液。

4.    加入 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 2-NBDG 染色溶液。注意：需要為每個(gè)細(xì)胞系和每個(gè)特定實(shí)驗(yàn)確定最佳孵育時(shí)間。我們將 CHO-K1 細(xì)胞在 37 歲時(shí)孵育oC 與 100 μM 2-NBDG （~34 μg/mL） 一起 20 分鐘以顯示足夠的葡萄糖攝取。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參閱數(shù)據(jù)分析。

5.    在孵育結(jié)束時(shí)，以5rpm離心板800分鐘。

6.    在不干擾細(xì)胞的情況下去除2-NBDG染色溶液。

7.    對(duì)于熒光顯微鏡：用檢測(cè)緩沖液I（組分B）洗滌細(xì)胞一次。將細(xì)胞保存在 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的測(cè)定緩沖液 II（組分 C）中。使用帶有FITC濾光片的熒光顯微鏡監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)。

8.    對(duì)于流式細(xì)胞儀：如果需要，使用 EDTA 分離細(xì)胞，并將細(xì)胞重懸于 100 μL/樣品的檢測(cè)緩沖液 I（組分 B）中。使用帶有530/30 nm濾光片（FITC通道）的流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

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